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ELISA試劑盒新配方實(shí)現(xiàn)iPS效率大躍進(jìn)

2017-04-28 [1479]

ELISA試劑盒將包含維生素C在內(nèi)的三種化合物與規(guī)范iPS計(jì)劃,明顯提高了體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為多能干細(xì)胞的功率。該辦法在轉(zhuǎn)化小鼠肌膚細(xì)胞時(shí),取得的干細(xì)胞數(shù)量比規(guī)范辦法增加了二十多倍。
這個(gè)辦法不只有效并且很牢靠,能大大加速iPS干細(xì)胞的各種使用,干細(xì)胞理論上能夠發(fā)育變成任何類型的細(xì)胞。
“功率的大幅提高,讓咱們有機(jī)會(huì)在高分辨率水平上研討重編程機(jī)制,”領(lǐng)導(dǎo)這項(xiàng)研討的NYU助理教授Matthias Stadtfeld說。
聞名科學(xué)家山中伸彌2006年提出了,將肌膚、血液或別的類型細(xì)胞重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)的規(guī)范計(jì)劃,他也因而取得了諾貝爾獎(jiǎng)。規(guī)范計(jì)劃經(jīng)過人為表達(dá)四個(gè)要害基因OKSM(Oct4、Klf4、Sox2和myc),誘導(dǎo)細(xì)胞回到與前期胚胎細(xì)胞相似的不成熟狀況。
在此基礎(chǔ)上,大家能夠?qū)⒉∪说募?xì)胞誘導(dǎo)變成iPSC,然后在體外擴(kuò)增并影響它們分化變成特定類型的細(xì)胞,比方血細(xì)胞、腦細(xì)胞、心肌細(xì)胞等。這些細(xì)胞理論上能夠用來代替病人的受損組織。
研討人員選用的三種化合物,有維生素C和兩個(gè)影響Wnt和TGF-β通路的化合物。維生素C是一種強(qiáng)壯的抗氧化劑,近來它被發(fā)現(xiàn)能夠激活重塑染色質(zhì)的酶,進(jìn)而調(diào)控基因表達(dá),促進(jìn)iPS誘導(dǎo)。而Wnt和TGF-β通路在細(xì)胞中調(diào)控多個(gè)與成長有關(guān)的進(jìn)程。
成纖維細(xì)胞是iPS研討中zui常用的細(xì)胞類型,研討人員在表達(dá)OKSM的小鼠肌膚成纖維細(xì)胞中,添加了上述三種化合物。在培育細(xì)胞一星期后,轉(zhuǎn)化功率到達(dá)了大概80%。
在受傷或傳染以后,血液祖細(xì)胞能夠代替受損的血細(xì)胞。OKSM辦法能夠緩慢地將這些細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)楦杉?xì)胞,功率到達(dá)30%。研討人員將OKSM與三種化合物相,在不到一個(gè)星期的時(shí)間里,轉(zhuǎn)化率接近了。研討人員用這種辦法轉(zhuǎn)化小鼠肝臟祖細(xì)胞,也取得了快到的產(chǎn)值。
ELISA試劑盒轉(zhuǎn)化率的明顯提高能有助于將來的iPS研討,讓iPS誘導(dǎo)變成一個(gè)更可猜測的事情。“這么就更簡單解析重編程背面的詳細(xì)機(jī)制,檢測iPS中可能發(fā)作的意外事情,”他說。
 
ELISA試劑盒這項(xiàng)研討中的三種化合物經(jīng)過了大家的廣泛研討,簡直沒有什么不知道或有害的影響。而OKSM有時(shí)會(huì)對(duì)iPSC發(fā)作意外影響,例如導(dǎo)致發(fā)育缺點(diǎn)。新技術(shù)有望讓iPSC愈加安全,“能夠想見,讓重編程進(jìn)程更順利能夠降低發(fā)作異常的危險(xiǎn),”Dr. Stadtfeld說。“咱們正在跟進(jìn)這個(gè)疑問。