ELISA試劑盒試驗中常會遇到這些疑問：    
1. 溫育條件不一致，恒溫箱溫育較水浴顯色深，OD值高出0.1-0.15，均選用恒溫箱。如用水浴水溫應控制在37℃。    
2. 樣品數量不一，加樣時間長短不一。當重復某一樣品時，加樣時間盡可能與初次挨近。    
考慮到有些客戶沒有試驗設備，我公司還可以供應代測效力，只需付試劑盒的費用，代測是免費的哦！
間接法 ：此測定辦法與直接法相似，不一樣在于一級抗體沒有酶符號，改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。    
雙抗體夾心法 ：被查看的抗原包被在兩個抗體之間，其間一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。
ELISA試劑盒另一個則是查看抗體，此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量；或不符號，再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。
這兩種抗體有必要留神選擇，才可防止交互反應或比賽一樣的抗原聯絡部位。        
比賽法：樣本里的抗原（清閑抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一起比賽一樣的抗體，當樣品里的清閑抗原越多，就可以聯絡越多的抗體，而固定抗原就只能聯絡到較少的抗體，反之亦然。
經清潔進程，洗去清閑抗原和抗體的復合物，只留下固定抗原和抗體的復合物，拿來與只需固定抗原的對照組作用相比較，依據呈色區別就可計算出樣品里的抗原含量。
ELISA試劑盒直接法 ：將抗原直接固定在固相載體上，參與酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。