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實(shí)驗(yàn)蛋白抗體是如何稀釋標(biāo)記之謎

2016-07-11 [1608]

很多朋友在實(shí)驗(yàn)過程中,常會向我們的技術(shù)提及這類問題,比如抗體中一抗,二抗應(yīng)該如何稀釋,現(xiàn)我司技術(shù)部對此問題進(jìn)行了解答:
問題:做斑點(diǎn)印跡,一抗為人的進(jìn)口血清,二抗為羊標(biāo)二抗,用的時候各自用什么稀釋 
我們所給予的解決辦法為以下三點(diǎn):
一,可以用封閉液(奶粉,BSA),也可以用緩沖液如(TBST,PBST)
二,一抗(血清)用的PBS稀釋,二抗用的封閉液1%的BSA 即(PBST)可。
三,封閉液1%BSA濃度低嗎一抗、二抗都用3%或者5%BSA來稀釋比較好吧,封閉的話,用的BSA濃度一樣大就行。
研究人員對熱帶蠅類以及在其體內(nèi)產(chǎn)卵的寄生蜂進(jìn)行了仔細(xì)觀察后揭示出了一個難以置信的相互作用的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò),如果沒有先進(jìn)的分子技術(shù),其中的一些相互作用仍然不會被發(fā)現(xiàn)。該復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)提出了有關(guān)物種是如何相互作用的問題。要揭示物種間相互作用的結(jié)果是富有挑戰(zhàn)性的。
在植物中,異染色質(zhì)——或緊湊排列的DNA——上的一個叫作H3K27me1的特別標(biāo)記在細(xì)胞分裂時必須得到保守,這樣其子細(xì)胞才能接受有著相似組織的DNA。
如今,一項(xiàng)由Yannick Jacob及其同事所作的新的研究顯示,在 ATXR5和ATXR6之間的特別的相互作用以及一個被稱作H3.1的組蛋白變異體在擬南芥中維持著這一關(guān)鍵性H3K27me1標(biāo)志;ATXR5和ATXR6是修飾組蛋白的2個酶,而組蛋白是將 DNA裝入異染色質(zhì)的蛋白。
研究人員以2.1埃的分辨率弄清楚了與H3.1肽形成復(fù)合物的ATXR5的晶體結(jié)構(gòu),而它顯示了為什么與不依賴于復(fù)制的H3.3變異體相比,ATXR5酶更傾向于依賴復(fù)制的H3.1變異體。他們的發(fā)現(xiàn)證明了組蛋白變異體是如何通過控制能夠重新塑造在細(xì)胞核中的異染色質(zhì)的酶來指示基因表達(dá)的后生變化的。