人ELISA試劑盒ELISA法特異性強 ,敏感性高 ,操作快速簡便 ,因而是免疫學檢驗中zui為常用的方法 ,也是我們基層醫院檢驗科免疫學檢驗的主要技術手段。我科乙肝五項、丙肝抗體、HIV抗體、梅毒抗體等均用ELISA法檢測。其中HBsAg的檢測量zui大。我們在實際工作中體會到ELISA法檢測的全程質量控制很重要 ,的試劑、良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。現將我們平時在操作中認為需要重視的步驟及遇到的一些問題報告如下 :
人ELISA試劑盒標本的采集和保存
一般在醫學免疫檢驗中均以血清作為檢測標本。血清標本可按常規方法采集 ,應注意避免溶血 ,因紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質 ,以HRP為標記的 ELISA測定中 ,溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染 ,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。標本儲存時間過長,IgG可聚合成多聚體 ,在間接ELISA測定中導致本底過深 ,甚至造成假陽性。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過1周測定的需低溫冰存。
人ELISA試劑盒試劑的準備
按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水 ,包括用于洗滌的 ,應為新鮮的和高質量的。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。